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深圳先进院举办inscopix神经元成像技术应用小鼠手术培训

发布时间: 2020/04/22浏览次数: 427

应中国科学院深圳先进技术研究院脑认知与脑疾病研究所(以下简称“深圳先进院”)邀请,格罗贝尔生物科技公司Global Biotech Inc,为深圳先进院圆满举办了一场由格罗贝尔为中国授权代理的inscopix nVoke2.0在体自由动物神经元成像应用的技术培训。

当日,深圳先进院20余名科研人员参加了这次inscopix nVoke2.0的小鼠手术培训。格罗贝尔生物科技公司技术人员带领大家一道顺利完成手术全过程。

 

我们对手术过程做以下记录,供神经科研人员参考:

1.       实验前准备好所有的手术器械。

2.       小鼠麻醉后,将小鼠的头部固定在脑定位仪上,打开头顶皮肤,将头骨上面清理干净,露出清晰骨缝,找到BregmaLambda点,将前后水平调好后,在LambdaBregma连线的中间位置,往左右两边取相同距离,进行左右水平的调整。

3.       根据算出来的目标组织位点,在目标位置在头骨上的投影点处钻一小孔,将准备好的病毒液体注射入目标位点,创口消毒消炎处理,缝合皮肤。

4.       2~4周以后,在之前打病毒的位置,用同样方法定位出目标位点。

5.       根据打算植入的透镜粗细判断要钻孔的大小,骨孔直径比透镜直径粗0.3~0.4mm即可,在目标点位四周相应位置处标出钻孔边缘位置,用电钻钻骨孔。一般要观察的目标位点要比透镜底端低约200微米即可,如果要观察的是较浅皮层位置,可以直接埋植透镜,如果要观察的是较深的脑区,则需要将埋植位点以上300~400微米以外的柱形脑组织区域全部除去。

6.       可以用相应粗细的平头注射针头连接上真空泵,用适宜压力吸除组织,吸除过程中不断在脑组织上方灌注生理盐水进行抽吸以去除血液,吸到目标位置上方约300~400微米即可,孔洞直径参考要埋植的透镜粗细,直到血液不再流出可停止灌流。

7.       在距离钻孔约5mm处钻2~3个浅孔,拧入2~3枚骨螺丝钉。

8.       将透镜与微型显微镜连接到夹持杆,并固定在定位仪上。

9.       打开数据采集软件,打开显微镜激发光,实时观察画面,将透镜慢慢深入动物脑内,关闭小鼠周围的强光,此时采集软件上大部分为黑色,待透镜接近目标病毒表达位置时,病毒的绿色荧光会使得画面较明显的变亮,根据画面中模糊能看出血管的影像或采集软件中光强的histogram峰值在7000左右,可以在此位置埋植透镜。

10.    用牙科水泥将骨螺钉和透镜上的黑色胶圈粘合在小鼠头骨上。

11.    待牙科水泥完全干燥坚硬后,将透镜夹持器小心取下。用黄蓝遮盖硅胶混合为完全绿色,涂在透镜上端。

12.    待小鼠恢复,需单笼饲养,防止被啃咬透镜。

 

多年来,格罗贝尔生物科技公司Global Biotech Inc,与深圳先进院保持良好的技术交流和合作,并每年作为金牌赞助商参加深圳先进院举办的各类脑科学会议和培训班,为中国脑科学发展做出力所能及的贡献。

特别声明:格罗贝尔生物科技公司(美国Global Bietech Inc)是Inscopix进入中国后于2017年首次且始终授权的中国代理商,拥有几十家国际国内一流科研水平的实验室用户服务经验。始终如一高水平售后技术服务是您完成此项实验的根本保障,请在购买前与我们做更深入的技术咨询和交流!

 

 fengdi-01.png小鼠完成.png小鼠手术中.png3.JPG2.JPG1.JPG

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